
大连理工大学王华楠|BF编辑优选:基于亚稳乳液高通量制备载细胞微凝胶
本篇研究来自大连理工大学王华楠教授课题组。本文主要介绍了一种以微流控液滴技术为基础,结合运用亚稳态乳液体系以及微流控集成策略,在保持高细胞活性的条件下实现了载细胞微凝胶的一步法连续高通量生产。 文章介绍 Large-scale single-cell encapsulation in microgels through metastable droplet-templating combined with microfluidic-integration Haoyue Zhang(张昊岳), Liyuan Zhang(张丽媛), Chuanfeng An(安传锋), Yang Zhang, Fei Shao, Yijie Gao, Yonghao Zhang, Hanting Li, Yujie Zhang, Changle Ren, Kai Sun, Wei He, Fang Cheng, Huanan Wang(王华楠) and David A Weitz 通讯作者: ■ 王华楠,大连理工大学 图1 所设计的高通量集成芯片结构、实物图以及皮肤创伤修复模型 我们提出了一种以微流控液滴技术为基础,结合运用亚稳态乳液体系以及微流控集成策略,在保持高细胞活性的条件下实现了载细胞微凝胶的一步法连续高通量生产。 图2 亚稳态乳液系统工作机理以及其与传统表面活性剂乳液工艺对比 首先,我们创新性的使用了一类两性短链氟化醇(PFAs)作为表面活性剂,并以此构建能够短暂保持稳定的亚稳态乳液体系。使用亚稳乳液体系制备微凝胶颗粒时,两相间较低的界面张力能够实现微液滴的均匀稳定制备,并在液滴接触前的短暂稳定窗口内完成海藻酸水凝胶的交联固化过程;同时,在微液滴接触后,其亚稳特性可使乳液立刻完成破乳步骤,以达到产品分离的目的。我们证明了其构建的亚稳乳液体系具有良好的生物相容性,其中包埋于微凝胶内的小鼠间充质干细胞的细胞存活率>98%。 图3 高通量集成芯片实际工作状况以及产品表征 在此基础上,基于计算流体力学(CFD)流量场以及压力场模拟结果,我们设计了一种可包含80个液滴生产单元的集成化芯片模型。进一步实验证明,使用该芯片设计可以实现高粒径均匀度(CV=3.40%)的微液滴连续稳定生产。结合水凝胶体系进一步调整实际生产参数并引入亚稳态乳液体系后,可在百倍于传统生产工艺的产量(10ml/h)条件下,连续稳定制备粒径分布小于4%的载细胞微凝胶产品。在细胞体外培养实验中,证实了微凝胶内细胞存活率大于95%;并在糖尿病大鼠皮肤修复模型中,证明了搭载细胞的功能能够得到保留,以此证明结合亚稳乳液体系的载细胞微凝胶高通量制备工艺所具有的高生物相容性。 图4 使用糖尿病大鼠皮肤创伤修复模型进行载细胞微凝胶产品的功能性表征...